【干货】SP8 HyVolution -- 高分辨共聚焦成像
高分辨率分辨细胞内信号传导网络的深层结构,需要高于200nm的分辨率。这超出了常规共聚焦显微镜的能力范围...
高分辨率
分辨细胞内信号传导网络的深层结构,需要高于200 nm的分辨率。这超出了常规共聚焦显微镜的能力范围。
以高灵敏HyD探测器及Huygens 技术为基础的HyVolution,能够为共聚焦提供高达130纳米的高分辨率,并且将轴向分辨率提高一倍。
A:共聚焦图像
B:HyVolution 图像
C:线粒体共聚焦图像与HyVolution图像分辨率比较,上:共聚焦图像;下:HyVolution图像;右:分辨率测量
D: Tubulin共聚焦图像与HyVolution图像分辨率比较,上:共聚焦图像;下:HyVolution图像;右:分辨率测量
多通道同时扫描
SP8 HyVolution能够为多色荧光标记的活细胞提供真正的并行多通道扫描,确保采集多到种蛋白相互作用的高分辨快速动态过程。
徕卡共焦的无滤片光谱检测系统可以同时记录标本中多达5种荧光探针的信号。
HyVolution多通道活细胞采集。所有三种颜色在同一时间内完成5D采集(非序列扫描)。HeLa Kyoto细胞。GPI-YFP(黄)、H2B-mCherry(蓝)、Tubulin-SiR(红)。样品图由德国 海德堡EMBL的Sabine Reither 提供。
速度没有丝毫损失
一般的共聚焦系统以牺牲速度来获得更好的分辨率。
SP8 HyVolution丝毫没有限制图像采集的速度,完全支持 SP8(40 fps @ 512-512 像素)的全帧速率。
因此您能够采集毫秒内发生的变化,并以高清晰度观察细胞动态的超微细节。
SP8HyVolution多通道活细胞采集。所有三种颜色在同一时间内完成5D 采集(没有连续扫描)。HeLaKyoto 细胞。Golgi-GFP(绿)、GPI-YFP(黄)、H2B-mCherry(白)。样品由德国海德堡EMBL的,SabineReither 提供。
最真实的呈现
噪声破坏反卷积效果。由PMT产生的常规背景噪声会 给反卷积带来假象并损失分辨率。
徕卡TCSSP8 HyD能够探测到极弱的荧光信号,几乎不产生任何背景噪声,因为:
- 徕卡 HyD探测器具有卓越的信噪比,能够达到光子计数水平
- 徕卡TCS SP8具有极高的光子传输效率
→ HyD与Huygens完美配合,您得到的图像对每一个细节的传递都是最真实的
噪声破坏反卷积效果:由PMT生成的含噪图像难以分辨140纳米的DNA 折纸纳米尺。模拟数据。
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