TIL疗法迎战实体瘤：深度科普，最新数据

TIL技术如何操作？疗效如何？...



肿瘤免疫治疗，除了以PD-1抗体、PD-L1抗体、CTLA-4抗体等为代表的免疫检查点抑制剂外，还有其他众多类型。比如以T-VEC为代表的溶瘤病毒，比如以新生抗原肽为代表的个性化肿瘤疫苗，比如以CAR-T、TCR-T、TIL为代表的肿瘤免疫细胞治疗。

要论历史，肿瘤免疫细胞治疗是其中最悠久的代表。不过，由于CIK、DC-CIK、NK等非特异疗法，在中国内地的不当推广和泛滥，导致了臭名昭著的“魏则西事件”，进而导致整个名词都被不同程度地“污名化”。

在此，本文要做一个扼要的科普：CAR-T、TCR-T技术在体外对提取的免疫细胞进行过基因改造，从而使回输的免疫细胞具有攻击肿瘤的特异性；TIL技术在体外对肿瘤组织周围的免疫细胞，进行过多重筛选，同样使回输的免疫细胞具有攻击肿瘤的特异性——这些具有特异性识别和攻击癌细胞的新型肿瘤免疫细胞治疗，与老旧的非特异的CIK、DC-CIK、NK等技术，有本质的区别。TIL技术是如何操作的呢？下面以HPV病毒蛋白特异性TIL疗法为例，详细说明：

第一步：获取手术切除的新鲜肿瘤组织。一般要求肿瘤组织的体积大于1cm3，太小的肿瘤组织无法分离得到足够的免疫细胞。此外，手术切除的肿瘤组织需要即刻被接收和处理，放的时间久了，癌细胞以及癌细胞周围的免疫细胞都死了，后面的一切都免谈了——这一步，有两个精髓。一个是肿瘤要足够大，一个是动作要足够快。外科医生把肿瘤切下来之后，要赶紧接收，否则黄花菜都凉了。

第二步，把切下来的肿瘤组织（同时含有癌细胞和免疫细胞）分成若干份，加入白介素2培养，培养一段时间后只有免疫细胞（尤其是T细胞）可以存活。

第三步，检测存活下来的免疫细胞对肿瘤的杀伤力和特异性。一开始切下来的肿瘤组织是分成若干份的，经过白介素2培养后只剩下免疫细胞，这些免疫细胞也是分成若干份的。甚至，如果一开始取下来的组织足够大或者免疫细胞比例足够高，再第二步的后期，还可以继续把每一份免疫细胞再分成若干份。这样下来，一份肿瘤组织切下来，最后可以培养出几十上百份识别能力、抗癌活性以及特异性不同的免疫细胞。然后拿肿瘤特有的癌蛋白，在HPV病毒特异性TIL疗法中，就是拿HPV病毒特有的癌蛋白E6、E7，去检测每一份免疫细胞的识别力和攻击力。这样就能挑选出各方面能力都最优的一两份免疫细胞，然后再把这一两份免疫细胞玩命扩增出来。这一步，是TIL疗法区别与普通的CIK、DC-CIK、NK等老旧技术的核心和关键。一开始的细胞分成几十上百份，分别拿癌细胞特有的癌蛋白、多肽等进行筛选和测试，挑选出特异性的免疫细胞，这是非常非常重要的一步。

第四步，利用大剂量化疗（一般是环磷酰胺和氟达拉滨）对病友进行预处理，清除掉病友体内预存的免疫细胞。这一步，不少专家认为也是非常重要的。但是，这一步的副作用和风险也是不小的，预处理以后的病友，丧失了基本的抗感染能力，需要住在特殊的洁净舱里，否则一旦感染，后果不堪设想。当然，由于风险较大且真实的作用存疑，目前并不是所有的专家都坚持应该做这一步。

第五步，第三步筛选、扩增和活化好的免疫细胞，回输给病友。

TIL疗法疗效如何呢？给大家分享两篇最新的研究成果。第一篇是2018年底发表在CCR杂志上的前瞻性研究，入组的是晚期恶性黑色素瘤患者，接受的是经典的TIL疗法的治疗。一共分成3类患者：

• 43名未接受过任何治疗的晚期恶性黑色瘤患者，这类患者的有效率为47%，大约相当于接受了PD-1联合伊匹木单抗双免疫治疗的有效率。
• 21名接受过CTLA-4抗体（伊匹木单抗）治疗失败的病友，接受TIL治疗的有效率为38%，略高于单独使用PD1抗体的有效率。
• 9名接受过PD-1抗体治疗失败的病友，接受TIL治疗的有效率为33%，这是非常了不起的数据。PD-1抗体治疗失败的晚期恶性黑色素瘤，目前能接受的其他治疗非常有限（联合伊匹木单抗、联合溶瘤病毒），已经公布的其他治疗有效率均低于33%。

TIL疗法治疗晚期恶性黑色瘤，是目前经验最充足，数据最多的。TIL疗法治疗初治的恶性黑色瘤，有效率徘徊在40%-50%，完全缓解率在20%，完全缓解的病友其中大部分可实现临床治愈。

除了恶性黑色瘤，近年来TIL疗法在其他肿瘤中也取得了一系列的突破。这里分享第二篇文章，是上个月发表在CCR杂志上的前瞻性II期临床试验。入组了18位HPV病毒感染阳性的晚期宫颈癌患者和11位HPV感染阳性的其他晚期实体瘤患者（主要是头颈部鳞癌），接受HPV病毒特异性TIL疗法治疗。结果显示：18位晚期宫颈癌的有效率为28%，而11位其他实体瘤患者的有效率为18%——这都是其他治疗失败的、无药可用的晚期实体瘤患者，有效率达到18%-28%，已经非常不容易。其中2名宫颈癌患者实现了肿瘤完全消失，疗效保持的时间已经分别超过67个月和53个月，TIL疗法让两位原本无药可救的晚期宫颈癌患者“无瘤生存“了5年多，振奋人心。以下是其中一位治疗有效的患者，治疗前后的影像学变化图：参考文献

1. Prospective Analysis of Adoptive TIL Therapy in Patients withMetastatic Melanoma: Response, Impact of Anti-CTLA4, and Biomarkers to PredictClinical Outcome. Forget MA et al. Clin Cancer Res. (2018)

2. A phase II study of tumor-infiltrating lymphocyte therapy for humanpapillomavirus-associated epithelial cancers.Clin Cancer Res. 2018 Dec 5. pii: clincanres.2722.2018. doi:10.1158/1078-0432.CCR-18-2722

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