Angew. Chem.同位素标记检测相同组蛋白的翻译后修饰

组蛋白的翻译后修饰在转录、复制、DNA修复等重要生物学过程中发挥了重要作用，大部分的组蛋白的翻译后修饰...



组蛋白的翻译后修饰在转录、复制、DNA修复等重要生物学过程中发挥了重要作用，大部分的组蛋白的翻译后修饰发生在形成核小体的核心组蛋白的尾巴上，此前由于组蛋白八聚体的存在，广泛认为组蛋白的翻译后修饰是对称的，可是此结论由于最近发现的H3组蛋白上不对称的磷酸化而被推翻，也使组蛋白的不对称后修饰以及相同组蛋白修饰之间的（顺式）交流和姐妹组蛋白间（反式）的交流成为了研究染色质的一个新方面。

现有的组蛋白的翻译后修饰的检测方法是通过水解蛋白之后进行质谱检测，但是这样会丢失这些修饰的位置信息，要想获得此信息需要分析工具可以检测非变性的核小体，同时还要分辨相同的组蛋白。

因此，本文的作者发展了一种全新的标记方法，通过不同同位素标记的和不对称修饰的核小体来研究反式和顺式核小体交流（crosstalk）。他们设计了一个分别被13C和15N标记的H3组蛋白，且其中一个设计为了修饰前体，从而可以通过NMR来分别研究不同的核小体的行为。在得到了设计好的H3之后，他们通过时间分辨NMR（time-resolved NMR）来研究H3修饰之间的交流。

之后，他们利用此方法对H3S10的磷酸化对Gcn酶对H3K14的乙酰化速率的影响进行了评估，他们利用上述方法发现S10的磷酸化会较快地催化顺式的K14的乙酰化，而对反式的则较慢，证实了此方法的可行性。

文章链接：http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.201601938/epdf

文章DOI：10.1002/ange.201601938

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